活细胞成像
活细胞单分子定位显微镜使用Vutara
生物成像需要观察细胞内的动态结构;观察细胞中的单个生物分子(粒子跟踪)或观察生物过程，如膜、细胞器或细胞骨架运动。
的Vutara VXL显微镜的功能是理想的活细胞单分子定位显微镜:
- 使用双平面专利技术进行三维定位——每幅图像有1µm的三维数据，无需取Z序列
- 轴向范围可通过Z系列扩展
- 快速采集-全帧最高可达800帧，最高可达3000帧，ROI较小
- 敏感探测器冷却科学CMOS相机
粒子跟踪
Vutara VXL显微镜是为单分子定位显微镜而设计的，因此是为粒子跟踪实验而理想设计的。Vutara具有高速三维成像单个荧光团的固有能力，这使它成为粒子跟踪的理想工具。样品可以用有机染料、蛋白质或量子点进行标记，并使用Vutara VXL的高速和灵敏相机进行成像。Vutara的SRX软件内置粒子跟踪算法跟踪多个帧的荧光团。这是单分子定位显微镜相对于基于图像的超分辨率显微镜(如STED或SIM)的一个强大而独特的特性。SRX软件还包括一个全面的粒子跟踪统计软件包，用于分析您的数据。
在左边，我们可以看到用量子点标记的单个EGF受体的扩散。
细胞成像
Vutara VXL显微镜是为单分子定位显微镜而设计的，能够在有意义的时间尺度上捕捉生物运动。这种独特的成像方式允许用户收集感兴趣的结构的动态超分辨率图像，同时也为用户提供每个分子随时间的精确3D位置。这突出了单分子定位显微镜独特的成像方式，并将其与基于图像的超分辨率技术区分开来。
在右边，我们看到两个在活细胞中监测线粒体动态的实验。一个用橙色的HaloTag®染料(549)成像，另一个用光活化的远红色染料(PA-JF-646®)标记。
结合粒子跟踪和细胞成像
Vutara VXL显微镜的能力执行多色单分子成像允许一些独特的实验设计。左边是表达tomm-20::HaloTag®细胞的两色实验。在这个实验中，tomm20::HaloTag®被标记为密集浓度的JF549®和非常稀疏浓度的PA-JF646®。这允许密集染料被用作上下文标记，允许随着时间的推移重建和定位线粒体。而第二种染料则可以跟踪单个分子在线粒体中的扩散情况。利用这项技术，人们可以监测细胞膜中蛋白质扩散如何随着线粒体的流动而发生变化，并进行融合或裂变。
