DNA-PAINT成像
探索DNA-PAINT解决方案
多路多色dna -油漆成像的唯一开箱即用的解决方案
再加上布鲁克的软件控制，自动化，完全集成微流体装置,Vutara VXL超分辨率显微镜唯一的商业系统提供现成的多路DNA-PAINT功能。在这些工具上，DNA-PAINT成像可以在单分子定位显微镜中实现10 nm以下的定位精度具有无限的多路复用潜力．
此外，带有微流体系统的Vutara显微镜提供了额外的好处:
- 无麻烦的设置与专家服务和支持，以加快时间到数据收集betway手机客户端下载
- 结果比通过改造系统收集的数据更加可靠和可重复
- 自动化和多条件/多用户编程，便于可扩展的实验设计
DNA-PAINT是什么?
DNA-PAINT是什么?
DNA-PAINT是一种单分子定位技术，通过将短(<10个核苷酸)用荧光团标记的寡核苷酸与与目标分子(通常是抗体)结合的互补寡核苷酸结合。它允许广泛的成像模式，从全细胞广泛的z -栈到高分辨率的多目标图像。
了解DNA-PAINT成像的优势
- 更高的光子产生:眨眼的持续时间通常比传统的dSTORM更长。与dSTORM和PALM等方法相比，荧光团的光子产率更高，因此可以实现更高的定位精度(<10 nm)。
- 实际上unbleachable成像:样品被沐浴在过量的荧光团中，允许极长时间的成像。
- 无限多路复用潜力:由于目标特异性是由核苷酸序列决定的，使用正确的工具，就有可能用不同的寡核苷酸序列标记多个目标。使用Vutara的集成微流体单元，可以从样品中清洗给定目标的成像链，并添加标记不同生物目标的不同成像链。
dna涂料是如何工作的?
dna涂料是如何工作的?
DNA-PAINT的工作原理是将一个含有荧光团的短“成像寡核苷酸”与一个称为“对接链”的互补寡核苷酸短暂结合在目标上，如抗体、纳米体、适配体或自杀酶配体。
使用dna涂料超分辨率显微镜
DNA-PAINT超分辨率成像包括以下几个步骤:
- 样品通过常规技术标记为“对接链”，并准备成像。
- 成像时，样品浸泡在成像缓冲液(通常是PBS，但也可以包括氧清除剂)和低浓度(通常为0.1-1 nM)的成像寡聚体(与对接链互补)中。成像寡核苷酸通常为9-10个核苷酸长度，并包含一个荧光团。我们推荐Cy3B用于DNA-PAINT，因为它具有氟原性，因此背景较低。
- 一旦进入成像缓冲器，就可以对样品进行成像。成像链与对接链的瞬时结合阻止了荧光团的扩散，使其能够在相机上成像。
由于样本沐浴在大量过量的不断交换的成像链中，目标基本上是不可漂白的，这使得批量处理大量帧和扩展的z -栈成为可能。
为什么使用DNA-PAINT ?
为什么要使用DNA-PAINT进行细胞3D超分辨率成像?
高精度定位
DNA-PAINT定位精度可达10纳米，是目前最精确的显微镜技术之一。
在这里，使用Vutara显微镜和1.2 NA水浸泡物镜进行DNA-PAINT实验。图像显示了一个完整的BS-C-1细胞微管蛋白网络，微管蛋白抗体与DNA-PAINT二抗结合。插图显示了微管蛋白网络的放大部分。微管腔清晰可见。
多色Unbleachable成像
DNA-PAINT技术使多路多色超分辨率成像成为可能。
DNA-PAINT具有大规模多色z -栈的潜力，因为样品沐浴在几乎无限供应的荧光团中。这使得由数百万个本地化组成的大规模z-stack成像成为可能。
在这里，一个双色DNA-PAINT实验是在Vutara单分子定位显微镜上进行的。微管蛋白用青色表示，网格蛋白用洋红色表示。此外，由于DNA-PAINT的不可漂白性质，大z堆栈是可能的。
无限多路复用潜力
DNA-PAINT在多路成像方面有着巨大的潜力。
在这里，使用Vutara VXL和集成流体单元进行了多目标DNA-PAINT实验。在不同的探测器上使用正交对接链，可能有无限数量的目标。
图中还显示了在Vutara单分子定位显微镜和集成流体单元上进行的四靶DNA-PAINT实验。f -actin-洋红色，tom20-青色，管状蛋白-黄色和网格蛋白-绿色。
样品图片
样本图像:dna -涂料改进超分辨率成像
BS-C-1用抗微管蛋白、肌动蛋白、抗tom20和抗网格蛋白标记。正交2ºDNA-PAINT抗体购于Massive-Photonics.com．
