4D蛋白质组学™

随着timsTOF平台的引入,通过使用与UHR-QTOF技术耦合的TIMS增加气相离子分离的额外维度,实现了技术的下一次发展。这导致了从3D蛋白质组学(保留时间、m/z和MS/MS指纹)向4D蛋白质组学的转变™ (添加固有CCS值)。

4D-MBR和dia PASEF

4D-MBR和dia PASEF®:开创4D蛋白质组学领域™

timsTOF Pro和timsTOF fleX中离子迁移率维度的增加比灵敏度、选择性和MS/MS采集速度的提高带来了更多的好处。独特的tims设计允许重复测量所有检测离子的碰撞截面(CCS)值,这些值可用于进一步提高系统的选择性,从而从复杂样品和短梯度分析中获得越来越可靠的相对定量信息。

4D-MBR:解决缺失值问题

4D-MBR:解决短梯度LFQ实验的缺失值问题

DIA是解决价值缺失问题最广泛使用的收购策略。然而,使用它需要构建光谱库——当它涉及一种罕见的生物体时,这可能是及时而困难的——而传统的DIA方法速度太慢,无法与短梯度分析兼容。在这种情况下,PASEF-LFQ提供了速度、灵活性和可靠性。尽管如此,即使在>100Hz MS/MS的情况下,在每次分析中,某些肽可能不会被选择用于裂解,尤其是在使用短梯度时。

已开发了运行间匹配(MBR)方法来解决此缺失值问题。MBR使用窄的m/z和保留时间窗口提取所有待量化肽的强度信息。这种过滤器组合,以前认为不够具体,导致比率测量不准确。4D-MBR在第一个m/z和保留时间过滤器上增加了一个额外的CCS过滤器,允许更大的特异性,如我们的应用说明所示LC-MS 151.

4D-MBR应用于高通量血浆蛋白质组学结果,用于定量192名患者和20份QC血浆样品消化,使用Evosep One LC系统以11.5分钟的梯度分离。(点击放大)

迪亚帕塞夫

迪亚帕塞夫®:将DIA分析提升到下一个层次

DIA与PASEF的结合®允许补偿传统的DIA陷阱:通过在连续tims事件中使用m/z隔离窗口模式,DIA PASEF中使用的离子百分比必威官网体育下载®可以大大增加(对于低复杂度样本,可以达到100%,对于高复杂度样本,仍然比使用类似隔离窗口大小和m:z范围的传统DIA方法高5倍)。迪亚帕塞夫酒店®可缩短循环时间,使其与短梯度分离兼容,同时保持高选择性。它得益于tims空间浓度效应,该效应允许提高灵敏度,并将DIA选择性提升到下一个水平,实现全4D蛋白质组学™ 支持

迪亚帕塞夫®现在可以使用OpenSwath&MOBI-DIK或Biognosys的Spectronaut软件处理数据。通过阅读我们的应用说明了解更多信息LC-MS 157LC-MS 160.