生物成像需要观察细胞内的动态结构;可视化细胞中的单个生物分子(粒子跟踪)或观察生物过程,如膜、细胞器或细胞骨架运动。
这个Vutara VXL显微镜的功能是活细胞单分子定位显微镜的理想选择:
Vutara VXL显微镜设计用于单分子定位显微镜,因此是粒子跟踪实验的理想设计。Vutara固有的以高速和三维成像单个荧光团的能力使其成为粒子跟踪的理想选择。样品可以用有机染料、蛋白质或量子点进行标记,并使用Vutara VXL的高速高灵敏度照相机进行成像。武塔拉酒店SRX软件具有内置的粒子跟踪算法,用于在多个帧上跟踪荧光团。这是单分子定位显微镜相对于基于图像的超分辨率显微镜(如STED或SIM)的强大而独特的功能。SRX软件还包括一个全面的粒子跟踪统计软件包,用于分析数据。
在左边我们可以看到一个用量子点标记的单一EGF受体的扩散。
Vutara VXL显微镜专为单分子定位显微镜设计,能够在有意义的时间尺度上捕捉生物运动。这种独特的成像方式允许用户收集感兴趣结构的动态超分辨率图像,同时也为用户提供每个分子随时间变化的精确3D位置。这突出了单分子定位显微镜独特的成像模式,并使其与基于成像的超分辨率技术区别开来。
在右边,我们看到两个实验监测活细胞中的线粒体动力学。一个用橙色HaloTag®染料(549)成像,另一个用可光致变色的远红色染料(PA-JF-646®)标记。
Vutara VXL显微镜执行多色单分子成像的能力允许一些独特的实验设计。左侧显示了在表达tomm-20::HaloTag®的细胞中进行的双色实验。在本实验中,tomm20::HaloTag®标记为浓度密集的JF549®和浓度非常稀疏的PA-JF646®。这使得致密染料可以用作背景标记物,允许线粒体随着时间的推移进行重建和定位。而第二种染料可以追踪线粒体中单个分子的扩散。利用这项技术,人们可以监测膜中蛋白质的扩散如何随着线粒体的运输和融合或分裂而变化。