共焦显微镜

Live-Cell成像

共聚焦荧光显微镜研究活细胞的好处

Live-Cell研究

活细胞研究已经成为生物学家研究细胞功能以了解基本细胞生物学、疾病的病因和治疗,以及生殖和发育过程的必要条件。活细胞成像现在是活细胞研究中使用的标准技术。

活细胞成像技术起源于20世纪初的微电影技术,并在20世纪80年代由井上信野(Shinye Inoue)等先行者扩展到视频显微镜技术。20世纪90年代中期荧光蛋白的发展推动了活细胞显微镜成像技术的发展,并一直延续到今天。

通过基因编码荧光标记物的表达以研究细胞功能的特定细胞结构和细胞室的能力继续吸引越来越多的科学家使用这种方法。在活细胞成像中使用荧光标记物也是活细胞共聚焦仪器发展的驱动因素。

用GFP标记的秀丽隐杆线虫最大投影。

多点共焦显微镜

用活细胞显微镜和荧光探针成像受到分辨率、速度和灵敏度的“铁三角”影响。这个铁三角说明了速度、强度和空间分辨率的不变平衡。为了提高一个方面的性能,需要牺牲一个或多个其他方面的某种程度的性能。

例如,如果需要更多的空间分辨率,则必须放弃某些速度和/或强度。在大多数共焦活细胞成像系统中,如旋转圆盘等,孔径选择方面的成像设置是固定的,这三个关键参数是无法调节的。因此,成像不能定制以满足特定的实验需求。活细胞显微镜的最新技术,就像布鲁克的Opterra二世该系统具有可选择的光圈,能够根据需要调整速度、分辨率和强度,以适应生命科学研究领域中各种不同的实验条件。

共聚焦活细胞成像现在能够四维(4D)成像。4D显微镜成像指的是快速三维延时成像,它也已经成为生物研究的标准要求。4D延时成像可以记录由荧光标记的蛋白质在细胞中向各个方向移动的结构,并已被证明能够揭示之前隐藏的细胞过程和蛋白质功能方面。

Opterra II紧密集成了扫描仪、CCD相机、照明、滤波和运动控制设备,以提供高速4D成像能力,为研究人员提供他们需要的灵活性,以适应他们特定的应用需求的采集设置。它还将光作为活细胞成像实验的刺激,允许在成像的同时进行光处理(漂白、转换、消融)。