共焦显微镜

Live-Cell成像

共聚焦荧光显微镜研究活细胞的益处

Live-Cell研究

活细胞研究已成为生物学家研究细胞功能,了解基本细胞生物学,疾病的起因和治疗,生殖和发育过程的要求。活细胞成像现在是活细胞研究中使用的标准技术。

活细胞成像起源于20世纪早期的微型电影摄影术,20世纪80年代井上信业等先行者将其扩展到视频显微术。上世纪90年代中期荧光蛋白的发展推动了活细胞显微镜成像技术的发展,这种技术一直延续到今天。

荧光标记基因编码表达的能力,针对特定的细胞结构和细胞功能的研究,继续吸引越来越多的科学家的方法论。荧光标记在活细胞成像中的应用也推动了活细胞共聚焦仪器的发展。

用GFP标记的秀丽隐杆线虫的最大投影。

多点共焦显微镜

用活细胞显微镜和荧光探针成像受制于分辨率、速度和灵敏度的“铁三角”。这个铁三角说明了速度、强度和空间分辨率的不可改变的平衡。为了提高一个方面的性能,需要牺牲一个或多个方面的性能。

例如,如果需要更多的空间分辨率,就必须丧失一些速度和/或强度。在大多数共焦活细胞成像系统中,如旋转盘,成像孔径选择的设置是固定的,这三个基本参数不能调整。因此,成像不能定制以满足特定的实验需要。活细胞显微镜的最新技术,就像布鲁克氏显微镜一样Opterra二世该系统具有可选择的光圈,能够根据需要调整速度、分辨率和强度,以适应一系列生命科学研究领域中不同的实验条件。

共焦活细胞成像现在能够进行四维(4D)成像。4D显微成像是指快速三维延时成像,也已成为生物学研究的标准要求。4D延时成像可以记录由荧光标记的蛋白质标记的结构,这些蛋白质在细胞中朝各个方向移动,并已被证明能够揭示以前隐藏的细胞过程和蛋白质功能方面。

Opterra II紧密集成了扫描仪、CCD相机、照明、滤波和运动控制设备,提供高速4D成像能力,让研究人员能够灵活地适应特定应用需求的采集设置。它还为活细胞成像实验带来了光的刺激,允许光刻操作(漂白、转换、消融)与成像同时进行。