有几个关键步骤对于确定与动态代谢过程相关的化合物非常重要;包括样品制备、数据采集和数据评价。只有控制了所有这些工作流步骤,才能在生物环境中获得有意义的见解。为了简化和协调这些问题,Bruker与加拿大阿尔伯塔大学的Liang Li教授及其团队合作,开发了T-ReX®LC-QTOF解决方案。
关键的第一步一道代谢组学是一种可重复制备的样品。因此,标准操作程序(sop)准备典型的临床研究样本,包括尿液和血浆,提供作为代谢组学解决方案的一部分。
采用T-ReX®LC-QTOF溶液,无需进行LC-MS/MS参数优化,在非靶向代谢组学工作流程中进行样品制备,即可获得高质量的LC-MS/MS数据。分析大样本队列,需要高保留时间稳定性洗提UHPLC结合专用T-ReX®洗脱代谢组学试剂盒:提供RP。该反相LC色谱柱试剂盒能够匹配保留时间的值布鲁克HMDB代谢物库2.0.的影响二世MS/MS数据采集使用优化的参数,其强大的性能是高质量数据采集的基础,使复杂样品的广泛分析研究。
接下来的数据采集,MetaboScape®软件提供了精简的数据评估,能够自动和有信心地识别相关的已知化合物:
“我们很高兴与布鲁克合作,制作了全面的霸王龙®LC-QTOF解决方案.完整的开箱即用的解决方案为相关已知内源性代谢物的高可信度鉴定提供了基础,并能够使用路径图将其设置到生物学环境中。这种解决方案将为研究人员在尿液或血浆等典型研究样本的非靶向代谢组学研究提供一个先机。”
磁共振质谱(MRMS)的表型分析
通过UHPLC-QTOF-MS/MS分析,在表型背景下发现代谢组学的复杂混合物的深入代谢分析成为可能。通常将不同的LC方法和正负离子模式的数据采集相结合,这是有成本的;每个样品分析所需的时间。
磁共振质谱(MRMS)极端分辨率可以通过省去耗时的色谱,加速表型组学和发现代谢组学研究中的样品吞吐量。流动注射分析(FIA)或基于MALDI的工作流程提供了不易通过LC-MS分析检测的化合物,并同时分析已知和未知的代谢物。
对于高通量需求,通常遇到在表型学研究,UHPLC-QTOF-MS/MS分析由MRMS aXelerate补充,一个无lc的MRMS工作流解决方案,检测和生成每个样品> 1000中-高水平代谢物的分子式,并揭示许多在LC-MS中未见的额外代谢物,包括极性化合物。通过FIA或MALDI的MRMS分析为复杂样品(如尿液和血浆提取物)的表型分析提供了高的样品吞吐量。强大的数据提取T-ReX®2D在MetaboScape®为自动注释提供信心。这是通过质量精度<0.2 ppm和质量分辨率可以超过>1百万,从而提高同位素精细结构保真度实现的。
在最近的出版物中了解FIA-CASI-MRMS工作流是如何帮助解决与人类代谢组数据库匹配和IFS模式增加2.6倍的“黑暗代谢物质”的需求的:发现代谢组学中精确质量分析的增强同位素精细结构方法:FIA-CASI-FTMS
“MRMS极端分辨率使我们能够解决下一代代谢类型,即同时快速描述与动态生物/化学过程相关的数百种已知和数千种新代谢物。MRMS与MetaboScape的结合也将使其他研究人员能够阐明这一新的、令人兴奋的研究领域,探索尚未‘黑暗代谢组’。”
仅供研究用途。不用于临床诊断程序。