什么是清除样本成像?

Clearing-Sample / Cleared-Tissue成像

组织清除技术已成为应用于组织三维微观结构分析(如神经科学、发育生物学、连接组学)的有价值的工具。

生物组织的主要成分,即水、脂类和蛋白质的折射率不同,导致光在通过组织时发生散射。组织清除可以改变通常不透明的样品的光学性质,使其变得透明,同时保持其结构和荧光标签的完整性。清除后,光可以在样本中穿行许多毫米而不受吸收和散射的限制,这是在样本内部进行高分辨率显微成像的理想选择。

光板显微镜利用清除样品的光学优势,实现快速、长期、类似共焦的光学切片和清除样品的高质量3D成像。

光学清除方法

组织清除方法通过去除、改变或替换某些成分使样品的RI均质。

清理方法可分为两类:

  • 基于溶剂的清除方法(例如uDISCO, 3DISCO, BABB)
  • Aqueous-based结算方法
    -简单浸泡(如SeeDB, FAST-Clear)
    -过量水合(如立方,鳞片)
    -水凝胶嵌入(如清晰度,PACT/PARS)

没有一种单一的清除方法可以适用于所有的组织类型、组织大小和/或实验。

溶剂型的结算方法
优点:清液质量高,清液速度快,标本保存时间长
缺点:毒性和/或腐蚀性,不适合脂质染色

Aqueous-based结算方法
优点:荧光蛋白发射的保存,油脂的保存,组织结构的保存
缺点:清理缓慢,不适合大样本