什么是清除样本成像?

清除样本/清除组织成像

组织清除技术已成为组织3D微观结构分析中的应用的有价值工具(例如神经科学,发育生物学,Connectomics)。

生物组织的主要成分的不同折射率(RI),即水,脂质和蛋白质导致光线通过组织时的光散射。组织清除改变通常不透明样品的光学性质,使它们透明,同时保持其结构和荧光标记完整。清理后,光可以通过不受吸收和散射的标本来行进多毫米,非常适合在样本内深度的高分辨率微观成像。

光纸显微镜利用清除样品的光学优势,实现快速,长期,相应的光学切片和清除样品的高质量3D成像。

光学清除方法

组织清除方法通过除去,改变或更换一些组分来均匀化样品的RI。

清除方法可以分为两类:

  • 基于溶剂的清算方法(例如,UDISCO,3DISCO,BABB)
  • 基于水的清算方法
    - 简单的浸没(例如蔬菜,快速清晰)
    - 超水量(例如,立方体,鳞片)
    - 水凝胶嵌入(例如,清晰度,协议/帕尔斯)

没有单一清除方法适用于所有组织类型,组织尺寸和/或实验。

基于溶剂的清算方法
优点:优质清洁,高清速度,储存长时间的标本
缺点:毒性和/或腐蚀性,不适合脂质染色

基于水的清算方法
优点:保存荧光蛋白排放,保存脂质,保护组织建筑
缺点:慢速清除,不适合大型样品