什么是清除样本成像?

Clearing-Sample / Cleared-Tissue成像

组织清除技术已成为组织三维微观结构分析(如神经科学、发育生物学、连接组学)的重要应用工具。

生物组织主要成分如水、脂和蛋白质的不同折射率(RI)导致光在穿过组织时发生散射。组织清除可以改变通常不透明样品的光学性质,使其透明,同时保持其结构和荧光标签的完整性。在清除后,光可以在样品中传播数毫米,不受吸收和散射的限制,非常适合在样品深处进行高分辨率显微成像。

光板显微镜利用清除样品的光学优势,实现快速、长期、共焦样光学切片和清除样品的高质量3D成像。

光清除方法

组织清除方法通过去除、改变或替换某些成分使样品的RI均质。

清除方法可分为两类:

  • 溶剂型清除方法(如uddisco, 3DISCO, BABB)
  • Aqueous-based结算方法
    -简单浸泡(如SeeDB, FAST-Clear)
    -水合过度(如立方,鳞片)
    -水凝胶包埋(如CLARITY, PACT/PARS)

没有一种单一的清除方法可以适用于所有的组织类型、组织大小和/或实验。

溶剂型的结算方法
优点:清液质量高,清液速度快,试样保存时间长
缺点:有毒和/或腐蚀性,不适合脂质染色

Aqueous-based结算方法
优点:保存荧光蛋白发射,保存脂质,保存组织结构
缺点:清理速度慢,不适合大样品