什么是清除样本成像?

清除样本/清除组织成像

组织清除技术已成为应用于组织三维微观结构分析(如神经科学、发育生物学、连接组学)的一种有价值的工具。

不同折射率(RI)生物组织的主要成分之一,即水、脂类和蛋白质,在光通过组织时会导致光散射。组织清除会修改通常不透明样品的光学特性,使其透明,同时保持其结构和荧光标记完整。清除后,光可以传播数毫秒米通过试样,不受吸收和散射的限制,适用于试样内部深处的高分辨率显微成像。

光片显微镜利用清除样品的光学优势,实现快速、长期、类似共焦的光学切片和高质量的清除样品3D成像。

光学清除方法

组织清除方法通过移除、改变或替换某些成分使样品的RI均匀化。

清算方法可分为两类:

  • 基于溶剂的清洗方法(例如uDISCO、3DISCO、BABB)
  • 水基清除法
    -简单浸泡(如SeeDB、快速清除)
    -过度水合作用(例如立方、鳞片)
    -水凝胶嵌入(例如透明度、PACT/PAR)

没有一种单一的清除方法适用于所有组织类型、组织大小和/或实验。

溶剂清洗法
优点:清洗质量高,清洗速度快,标本保存时间长
缺点:有毒和/或腐蚀性,不适合脂质染色

水基清除法
优点:保存荧光蛋白发射,保存脂质,保存组织结构
缺点:清洗速度慢,不适合大样本